كيفية جعل تب العازلة في 3 خطوات سهلة

المخزن المؤقت تب هو حل العازلة تتكون من قاعدة تريس، حمض البوريك و إدتا (أو تريس-بورات-إدتا تماما). وغالبا ما تستخدم هذه المخزن المؤقت لالهلاروس الكهربائي هلام الاغاروز في تحليل منتجات الحمض النووي الناتجة عن التضخيم ير، بروتوكولات تنقية الحمض النووي أو التجارب الاستنساخ الحمض النووي.

العازلة تب مفيدة بشكل خاص لفصل شظايا الحمض النووي أصغر (مو <1000)، مثل المنتجات الصغيرة من هضم انزيم الهضم.

تب لديه قدرة أكبر التخزين المؤقت، وسوف تعطي قرارا أكثر وضوحا من تاي العازلة. العازلة تاي هو حل يتكون من قاعدة تريس، حمض الخليك و إدتا (تريس أسيتات-إدتا).

تب هو عادة أكثر تكلفة من تاي ويثبط الحمض النووي ليغاز، والتي قد تسبب مشاكل إذا كان المقصود تنقية الحمض النووي اللاحقة وخطوات الربط. مع الخطوات البسيطة الثلاث التالية، تعلم كيفية جعل العازلة تب. يجب ألا يستغرق أكثر من 30 دقيقة لإنشاء هذا المخزن المؤقت. وإليك الطريقة:

إعداد حل الأسهم من إدتا

وينبغي إعداد إدتا (إيثيلينديامين تيتراسيتيك حمض) حل قبل الموعد المحدد. سوف إدتا لا تذهب تماما في حل حتى يتم تعديل درجة الحموضة إلى حوالي 8. 0. للحصول على محلول الأسهم 500 ملليلتر من 0. 5 M إدتا، تزن 93. 05 غراما من ملح الصوديوم إدتا (فو = 372. 2). ثم حله في 400 ملليلتر منزوع الأيونات الماء وضبط درجة الحموضة مع هيدروكسيد الصوديوم. بعد ذلك، أعلى يصل الحل إلى الحجم النهائي من 500 ملليلتر.

- 3>>

إعداد محلول مخزون من تب

جعل محلول مخزون (5x) من تب عن طريق وزن 54 غ قاعدة تريس (فو = 121. 14) و 27. 5 غرام حمض البوريك (فو = 61. 83) وحل كلاهما في حوالي 900 ملليلتر من الماء منزوع الأيونات. ثم تضاف 20 ملليلتر من 0. 5 M إدتا (الرقم الهيدروجيني 8. 0) وضبط الحل إلى الحجم النهائي من 1 لتر.

هذا الحل يمكن تخزينها في درجة حرارة الغرفة ولكن راسب ستشكل في الحلول القديمة. تخزين المخزن المؤقت في زجاجات وتجاهل إذا شكلت راسب.

إعداد حل العمل من تب

لالهلاروس الكهربائي هلام، ويمكن استخدام العازلة تب بتركيز 0. 5X (1: 10 التخفيف من الأسهم المركزة). تمييع حل المخزون بنسبة 10X في الماء منزوع الأيونات. تركيزات المذاب النهائي هي 45 ملي تريس-بورات و 1 ملي إدتا. المخزن المؤقت هو الآن جاهزة للاستخدام في تشغيل هلام الاغاروز.

ما تحتاجه

لجعل العازلة تب، ستحتاج فقط أربع مواد. البنود المتبقية في هذه القائمة هي المعدات. المواد الأربعة المطلوبة هي ملح الصوديوم إدتا، قاعدة تريس، حمض البوريك والمياه منزوع الأيونات.

أما بالنسبة للمعدات، فسوف تحتاج إلى مقياس درجة الحموضة ومعايير المعايرة، حسب الاقتضاء. وبالإضافة إلى ذلك، سوف تحتاج إلى 600 ملليلتر و 1500 ملليلتر الأكواب أو قوارير. تقريب احتياجات المعدات الخاصة بك هي اسطوانات تخرج وإثارة القضبان و لوحات التحريك.

تحقق من المخزون في المختبر الذي سوف تستخدم للتأكد من أن لديك كل ما تحتاجه قبل أن تبدأ. لا شيء أسوأ من الاضطرار إلى التوقف في منتصف إعداد الحل لأن كنت قد نفد من المواد المناسبة.

إذا كان المختبر الخاص بك في المدرسة أو موقع العمل الخاص بك، تحقق مع الموظفين المناسبين للتأكد من أن لديهم جميع العناصر في المخزون. القيام بذلك قد يوفر لك الوقت والطاقة في نهاية المطاف.