كل شيء عن إنزيمات تقييد

كم تعرف عن إنزيمات التقييد؟ الحصول على فهم أفضل لما يفعلونه ولماذا هم مهمون، مع هذا الاستعراض.

تحديد انزيمات تقييد

إندونوكليسيس تقييد هي فئة من الانزيمات التي تقطع جزيئات الحمض النووي. كل انزيم يعترف تسلسل فريد من النيوكليوتيدات في حبلا الحمض النووي. وعادة ما تكون هذه التتابعات حوالي 4 إلى 6 أزواج قاعدة طويلة. تسلسل هي باليندروميك في أن الحمض النووي مجانا حبلا لديه نفس التسلسل فقط في الاتجاه المعاكس.

وبعبارة أخرى، يتم قطع كل من خيوط الحمض النووي في نفس الموقع.

حيث توجد هذه الإنزيمات

توجد إنزيمات تقييدية في العديد من سلالات البكتيريا المختلفة حيث دورها البيولوجي هو المشاركة في الدفاع عن الخلايا. هذه الإنزيمات "تقيد" دنا (e. g الفيروسية) الخارجية التي تدخل الخلية، من خلال تدميره. الخلية المضيفة لديها نظام تعديل القيود التي ميثيلاتس الحمض النووي الخاص بها في مواقع محددة للإنزيمات تقييد كل منها، وبالتالي حمايتها من الانقسام. تم اكتشاف أكثر من 800 إنزيم معروف يعترف بأكثر من 100 متوالية نكليوتيد مختلفة.

- تستخدم في التكنولوجيا الحيوية

تستخدم إنزيمات تقييد في التكنولوجيا الحيوية لخفض الحمض النووي إلى فروع أصغر من أجل دراسة الاختلافات طول الشظية بين الأفراد (تقييد جزء طول بوليموفيسم - رفلب). كما أنها تستخدم لاستنساخ الجينات.

وقد استخدمت تقنيات رفلب لتحديد أن الأفراد أو مجموعات من الأفراد لديهم اختلافات مميزة في تسلسل الجينات وأنماط الانقسام تقييد في بعض المناطق من الجينوم.

المعرفة من هذه المجالات الفريدة هي أساس البصمات الحمض النووي. كل من هذه الطرق يعتمد على استخدام الاغاروز هلام الكهربائي لفصل شظايا الحمض النووي. العازلة تب، التي تتكون من قاعدة تريس، حمض البوريك، و إدتا، يستخدم عادة للهلام الكهربائي الاغاروز لفحص منتجات الحمض النووي.

أنواع إنزيمات التقييد

هناك ثلاثة أنواع مختلفة من إنزيمات التقييد. النوع الأول يخفض الحمض النووي في مواقع عشوائية بقدر 1000 أو أكثر من أزواج قاعدة من موقع الاعتراف. ويقطع النوع الثالث ما يقرب من 25 زوجا أساسيا من الموقع. أنواع الأول والثالث تتطلب أتب وقد تكون إنزيمات كبيرة مع وحدات فرعية متعددة. إنزيمات النوع الثاني، والتي تستخدم في الغالب في التكنولوجيا الحيوية، وقطع الحمض النووي ضمن تسلسل المعترف بها دون الحاجة إلى أتب وأصغر وأبسط.

يتم تسمية الإنزيمات المقيدة من النوع إي وفقا للأنواع البكتيرية التي يتم عزلها منها. على سبيل المثال، تم عزل إكوري الانزيم من

E. القولونية . معظم الجمهور على دراية ه. كولي تفشي في الطعام. يمكن لأنزيمات تقييد النوع الثاني أن تولد نوعين مختلفين من التخفيضات اعتمادا على ما إذا كانا يقطعان كلا من الخيوط في مركز تسلسل التعرف أو كل طرف أقرب إلى نهاية واحدة من تسلسل التعرف.

سوف يولد قطع السابق "نهايات حادة" مع عدم وجود النيوكليوتيدات المتراكمة. هذا الأخير يولد "لزجة" أو "متماسكة" ينتهي لأن كل جزء الناتجة من الحمض النووي لديه المتدلية التي تكمل شظايا أخرى. كلاهما مفيد في علم الوراثة الجزيئي لصنع الحمض النووي المؤتلف والبروتينات.

هذا الشكل من الحمض النووي يبرز لأنه يتم إنتاجه من خلال ربط (الترابط معا) اثنين أو أكثر من فروع مختلفة التي لم تكن مرتبطة أصلا معا.